- 主题:柱子之我见(六)
关于操作问题。
1 装柱。
柱子下面的活塞一定不要涂润滑剂,会被淋洗剂带到产品中的,可以采用四氟节门的。
干法和湿法装柱觉得没什么区别,只要能把柱子装实就行。装完的柱子应该要适度的紧
密(太密了淋洗剂走的太慢),一定要均匀(不然样品就会从一侧斜着下来)。书中写
的都是不能见到气泡,我觉得在大多数情况下有些小气泡没太大的影响,一加压气泡就
全下来了。当然如果你装的柱子总是有气泡就说明需要多练习了。但是柱子更忌讳的是
开裂,甭管竖的还是横的,都会影响分离效果,甚至作废!
2 加样。
用少量的溶剂溶样品加样,加完后将下面的活塞打开,待溶剂层下降至石英砂面时,再
加少量的低极性溶剂,然后再打开活塞,如此两三次,一般石英砂就基本是白色的了。
加入淋洗剂,一开始不要加压,等溶样品的溶剂和样品层有一段距离(2~4cm就够了)
,再加压,这样避免了溶剂(如二氯甲烷等)夹带样品快速下行。
3 淋洗剂的选择。
感觉上要使所需点在rf0.2~0.3左右的比较好。不要认为在板上爬高了分的比较开,过
柱子就用那种极性,如果rf在0.6,即使相差0.2也不容易在柱子上分开,因为柱子是一
个多次爬板的状态,可以通过公式的比较:0.6/0.8一次的分离度,肯定不如(0.2/0.3
)的三次方或四次方大。
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FROM 202.113.228.209
我遇到过,后来我装一截就用橡皮锤仔细敲打柱身,如此
反复几次,好像就解决这个问题了
【 在 buhui (逝者如斯) 的大作中提到: 】
: 我装的柱子有时候会横的开裂,
: 不管是干法还是湿法上样、装柱。
: 在吸附了样品的层和没有吸附的层之间容易这样,
: 然后过一会之后就一体了。
: 我保证不是流干了造成的,
: 谁碰到过类似情况?
: 【 在 clair (恐“龙”) 的大作中提到: 】
: : 关于操作问题。
: : 1 装柱。
: : 柱子下面的活塞一定不要涂润滑剂,会被淋洗剂带到产品中的,可以采用四氟节门的。
: .................(以下省略)
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FROM 10.10.120.178
装柱的时候上下可以加无水硫酸钠
一是吸水
二是加溶剂的时候可以防止冲到硅胶
也可以是石英沙(不过似乎要贵一些)
【 在 clair.bbs@bbs.nankai.edu.cn (恐“龙”) 的大作中提到: 】
: 关于操作问题。
: 1 装柱。
: 柱子下面的活塞一定不要涂润滑剂,会被淋洗剂带到产品中的,可以采用四氟节门的。
: 干法和湿法装柱觉得没什么区别,只要能把柱子装实就行。装完的柱子应该要适度的紧
: 密(太密了淋洗剂走的太慢),一定要均匀(不然样品就会从一侧斜着下来)。书中写
: 的都是不能见到气泡,我觉得在大多数情况下有些小气泡没太大的影响,一加压气泡就
: 全下来了。当然如果你装的柱子总是有气泡就说明需要多练习了。但是柱子更忌讳的是
: 开裂,甭管竖的还是横的,都会影响分离效果,甚至作废!
: 2 加样。
: 用少量的溶剂溶样品加样,加完后将下面的活塞打开,待溶剂层下降至石英砂面时,再
: 加少量的低极性溶剂,然后再打开活塞,如此两三次,一般石英砂就基本是白色的了。
: ...................
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FROM 202.200.235.28
用双链球的尾部敲打最好
装完了,加压用溶剂走几次
【 在 coast.bbs@bbs.nankai.edu.cn (小猛) 的大作中提到: 】
: 我遇到过,后来我装一截就用橡皮锤仔细敲打柱身,如此
: 反复几次,好像就解决这个问题了
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FROM 202.200.235.28