我也有些经验和大家探讨一下,过柱子里经验性的东西太多了,
1 展开剂得自己反复摸索,先找到合适的极性(Rf大小合适),
如果点分不开就换溶剂,极性大小心里有底了,然后多用几种溶剂
往想要的极性调呗,混合溶剂的分离效果一般比单一溶剂好。
2 柱子一般粗长好,柱效高嘛,当然要取决你想分离多少样品,
我就特地定做了一个直径40mm,长40cm的柱子,一次可分离
2g样品。
3 另外用较细的硅胶效率也高,在板上分离效果好,
过柱子未必分离得开,装柱子的硅胶越细分离效果就越好,
一般用100-200目的,但如果效果不好就可改用300目,只不过
用300目就得加压,否则淋洗太慢。
4 一般的最好采取梯度淋洗,分离效果会好一些。
5 淋洗液的收集问题:如果产品没有颜色,就得用一堆瓶子或试管
每次接相同体积得淋洗液,最后用薄层色谱检验,相同的合并,
过渡的淋洗液(薄层上有两个点)弃去。
【 在 firefox (狐狸~爱情很短,叹息太长) 的大作中提到: 】
: 求助:
: 1。我要分离的东西在氯仿/丙酮8:2的展开机跑板基本上分不开,(杂质极性小,约为10
: %左右吧)是不是我的展开剂选择的还不够好。对于这种极性很相近的东西,应该如何选
: 择展开剂呢?
:
: 2。要是过柱子的话,当用作洗脱剂的时候,是不是要把薄层TLC的极性适当减小?
: 另外是操作的问题,
: 1。我用干法装柱的话,在底部用真空泵抽吸填装硅胶,然后再装混有样品的硅胶,关于硅
: 胶的用量,我用的是内径2cm的柱子,我现在填10cm左右的硅胶,2-3cm的样品硅胶,(1
: g/2g硅胶)这个量可以么?
: .................(以下省略)
--
FROM 10.10.120.178