Nature发表了瑞士IVI应用改良的反向遗传学技术构建新型冠状病毒SARS-CoV-2感染性克隆的研究工作。

在病毒学研究中，构建病毒的感染性cDNA克隆至关重要，而反向遗传学技术是构建流感等RNA病毒cDNA的经典平台。但是由于冠状病毒的基因组过大，因此应用传统的基于E. coli的反向遗传平台构建SARS-CoV-2 cDNA具有一定难度。IVI研究人员应用酵母平台，构建了重组的RNA病毒，其中包括冠状病毒、黄病毒和副粘病毒。

该平台可以应用病毒的亚基因组（cRNA）、已克隆好的病毒DNA、临床病毒样品或合成的病毒DNA，应用一步TAR克隆法将病毒基因克隆至酿酒酵母的酵母人工染色体中。如果想获得感染性病毒RNA，则可应用T7-RNA聚合酶在体外转录病毒，从而“拯救”病毒。研究人员应用这一平台克隆并重建了流行的SARS-CoV-2。

其过程是通过SARS-CoV-2进行体外化学合成时下流行的病毒DNA，再直接克隆入酵母载体中，而后可以进行相应工程改造。全过程只需要一周时间。因此这项技术提供了一个迅速构建病毒感染性克隆从而研究病毒各种性状的平台。

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